ชีววิทยาของพืช · ระดับ 3

ต้นสร้างความแรงขึ้นมาจริงๆ ได้ยังไง

2.5a · 9 นาทีในการอ่าน

⚙ บทเรียนนี้แปลด้วยเครื่องและกำลังรอการตรวจทานโดยคน

สิ่งที่คุณต้องรู้

ต้นของคุณไม่ได้ผลิต THC — มันผลิต THCA ซึ่งกลายเป็น THC ก็ต่อเมื่อความร้อนหรือแสงทำให้มัน decarboxylate เพราะงั้นตัวเลขแล็บ “รวม THC 22%” ในดอกดิบส่วนใหญ่คือ THCA ความแรงถูกล็อกไว้ทางพันธุกรรม: ทุก cannabinoid แตกแขนงจากสารตั้งต้น CBGA ผ่านเอนไซม์ synthase ที่แข่งกัน ซึ่งกำหนดโดย DNA ของสายพันธุ์คุณ เพราะงั้นไม่มีการปรับธาตุอาหารหรือแสงใดทำให้สายพันธุ์ 15% ทดสอบออกมา 25% ได้ (Tahir et al. 2021) สภาพแวดล้อมช่วยให้ต้นไปถึงเพดานของมัน ไม่ใช่ยกเพดานให้สูงขึ้น

นี่คือสิ่งที่ทำเอานักปลูกส่วนใหญ่ตั้งตัวไม่ทัน: ต้นของคุณไม่ได้ผลิต THC มันผลิต THCA — tetrahydrocannabinolic acid — ซึ่งเป็นโมเลกุลที่ต่างกันสิ้นเชิงที่กลายเป็น THC ก็ต่อเมื่อคุณให้ความร้อนมัน ความแตกต่างนี้ไม่ใช่เรื่องคำพูด มันเดินสายใหม่ว่าคุณคิดเรื่องพันธุกรรม เพดานความแรง และทำไมการปรับธาตุอาหารยังไงก็ไม่ทำให้สายพันธุ์ 15% ทดสอบออกมา 25%

การเข้าใจเส้นทางชีวสังเคราะห์ — วิธีที่ต้นประกอบ cannabinoid จากสารตั้งต้นดิบ — เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการปลูกขั้นสูง มันอธิบายว่าทำไมความแรงถูกล็อกไว้ทางพันธุกรรม ทำไมคุณ “ป้อนทางให้” THC สูงขึ้นไม่ได้ และทำไมบางสายพันธุ์มีขีดจำกัดแข็งที่ไม่มีเทคนิคใดทะลุผ่านได้ ทีมของ Tahir ที่ University of Windsor ทำแผนที่ห่วงโซ่ทั้งหมดจากเมแทบอไลต์ปฐมภูมิไปจนถึง cannabinoid สุดท้าย แสดงคอขวดทางพันธุกรรมและเอนไซม์ที่แน่นอนซึ่งกำหนดว่าต้นของคุณผลิตอะไรได้

วิทยาศาสตร์เบื้องหลัง

CBGA — skeletal structure (C₂₂H₃₂O₄), a cannabinoid acid; aroma: parent of all CBGA C₂₂H₃₂O₄ cannabinoid acid · parent of all

ทีมของ Tahir ทบทวนเส้นทางชีวสังเคราะห์ของ cannabinoid ทั้งหมด จากเมแทบอไลต์ปฐมภูมิไปจนถึงสารประกอบ decarboxylate สุดท้ายที่คุณบริโภค นี่คือห่วงโซ่:

ขั้นที่ 1 — ก้อนอิฐ สองเส้นทางจัดหาวัตถุดิบ เส้นทาง MEP (ในพลาสติด) ผลิต geranyl pyrophosphate (GPP) ซึ่งเป็นก้อนอิฐ terpenoid 10 คาร์บอน เส้นทาง polyketide ผลิต olivetolic acid (OLA) จาก hexanoyl-CoA — สารประกอบฟีนอลิก 12 คาร์บอน สองเส้นทางนี้ทำงานในเซลล์ trichome และดึงจากคาร์บอนเมแทบอลิกปฐมภูมิ

ขั้นที่ 2 — สารตั้งต้นสากล เอนไซม์ชื่อ aromatic prenyltransferase (APT) หลอม GPP เข้ากับ olivetolic acid เพื่อผลิต cannabigerolic acid (CBGA) CBGA คือแม่ของ cannabinoid ทั้งปวง cannabinoid ทุกตัวในกัญชา — THC, CBD, CBC และทุกอนุพันธ์ของมัน — เริ่มในรูป CBGA ถ้าคุณเคยได้ยินเรื่องดอก CBG นั่นคือดอกจากต้นที่หยุดที่ขั้นนี้เพราะมันขาดเอนไซม์ที่จะแปลง CBGA ต่อ

ขั้นที่ 3 — ทางแยก เอนไซม์สามตัวที่แข่งกันออกฤทธิ์ต่อ CBGA เพื่อผลิตกรด cannabinoid หลักสามตัว: THCA synthase แปลง CBGA เป็น THCA CBDA synthase แปลง CBGA เป็น CBDA CBCA synthase แปลง CBGA เป็น CBCA (cannabichromenic acid) เอนไซม์สามตัวนี้แข่งกันเพื่อ substrate เดียวกัน (CBGA) พันธุกรรมของต้นคุณกำหนดว่ามันแสดงออกเอนไซม์ตัวไหนมากที่สุด และนั่นกำหนดว่าสายพันธุ์คุณเป็น THC-dominant, CBD-dominant หรือ hybrid

ขั้นที่ 4 — Decarboxylation cannabinoid ในรูปกรด (THCA, CBDA, CBCA) สูญเสียหมู่คาร์บอกซิล (-COOH) เมื่อสัมผัสความร้อน แสง หรือเวลา THCA กลายเป็น THC CBDA กลายเป็น CBD นี่คือปฏิกิริยาเคมีที่ไม่ใช่เอนไซม์ — ต้นไม่ได้ทำมัน คุณทำมันเมื่อจุดจอยท์ ให้ความร้อนเตาอบ หรือเก็บดอกไว้นานเป็นเดือนๆ วัสดุจากต้นสดบรรจุเกือบทั้งหมดในรูปกรด

คอขวดทางพันธุกรรม: THCA synthase และ CBDA synthase ถูกเข้ารหัสโดยยีนที่ locus ทางพันธุกรรมเดียว พวกมันมีความเหมือนของลำดับกรดอะมิโน 84% — พวกมันโดยพื้นฐานคือเอนไซม์เดียวกันที่มีการกลายพันธุ์สำคัญไม่กี่จุดที่เปลี่ยน substrate specificity ต้นที่ homozygous สำหรับยีน THCA synthase (BT/BT) ผลิต THCA เป็นหลัก ต้นที่ homozygous สำหรับ CBDA synthase (BD/BD) ผลิต CBDA เป็นหลัก ต้น heterozygous (BT/BD) ผลิตทั้งคู่ นี่คือเหตุผลที่การผสมข้ามสายพันธุ์ THC กับสายพันธุ์ CBD ให้ลูกที่มีอัตราส่วน THC:CBD หลากหลาย — พวกมันรับ allele เหล่านี้คนละชุดกัน

ทำไมคุณป้อนทางให้ THC สูงขึ้นไม่ได้: ความเข้มข้น THCA สูงสุดที่ต้นคุณผลิตได้ถูกกำหนดโดยระดับการแสดงออกและประสิทธิภาพการเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ THCA synthase ของมัน ซึ่งถูกล็อกไว้ทางพันธุกรรม ปัจจัยสภาพแวดล้อม (แสง ธาตุอาหาร น้ำ) ช่วยให้ต้นไปถึงเพดานทางพันธุกรรมของมันได้ด้วยการรักษามันให้แข็งแรงและผลิตดี แต่ยกเพดานไม่ได้ มันเหมือนกับขีดจำกัดความเร็ว — คุณจูนรถให้แตะขีดจำกัดได้ง่ายขึ้น แต่ตัวขีดจำกัดเองถูกพ่นไว้บนป้าย ทุกโมดูลในหลักสูตรนี้ที่แสดง “ไม่มีผลของ NPK ต่อความเข้มข้น cannabinoid” หรือ “ไม่มีผลของแสงต่อเปอร์เซ็นต์ความแรง” ล้วนเล่าเรื่องเดียวกัน: ความสามารถชีวสังเคราะห์ถูกกำหนดโดย DNA

ต้นกัญชาสร้าง THC และ CBD ขึ้นมาได้ยังไง สารตั้งต้นง่ายๆ ก่อตัวเป็น CBGA ซึ่งเป็น cannabinoid ต้นแบบ เอนไซม์ THCA synthase เปลี่ยน CBGA ให้เป็น THCA และ CBDA synthase เปลี่ยนให้เป็น CBDA จากนั้นความร้อนก็เปลี่ยนรูปกรดเหล่านี้ให้กลายเป็น THC และ CBD เส้นทางการสร้าง cannabinoid THC และ CBD ในช่อดอกของคุณมาจากไหนกันแน่ Olivetolic acid + GPP วัตถุดิบตั้งต้น CBGA cannabinoid “แม่” เอนไซม์ THCA synthase เอนไซม์ CBDA synthase THCA รูปกรด · ยังไม่ออกฤทธิ์ CBDA รูปกรด · ยังไม่ออกฤทธิ์ ความร้อน · decarb ความร้อน · decarb THC รูปออกฤทธิ์ที่คุณรู้สึกได้ CBD รูปออกฤทธิ์ที่คุณรู้สึกได้ พันธุกรรมเป็นตัวกำหนดว่า synthase ตัวไหนจะเด่น — มันถูกตั้งไว้ในเมล็ดแล้ว ต้นไม้สร้างกรดขึ้นมา ความร้อนเป็นตัวจบงาน นี่แหละคือเหตุผลที่ช่อดอกดิบแทบไม่ออกฤทธิ์จนกว่าจะสูบ vape หรือ decarb ที่มา: Tahir et al. (2021), Journal of Cannabis Research
พันธุกรรมเป็นตัวล็อกว่า synthase ตัวไหนจะเด่น ต้นไม้สร้างออกมาในรูปกรดก่อน แล้วความร้อนค่อยมาปิดงานให้สมบูรณ์ — นี่จึงเป็นเหตุผลว่าทำไมดอกดิบ ๆ ถึงแทบไม่ออกฤทธิ์เลยจนกว่าคุณจะสูบ vape หรือ decarb มันก่อนนะ
คำนวณ THC รวมจาก THCA อย่างไร กัญชาดิบเก็บ THC ไว้ในรูป THCA ซึ่งเป็นรูปกรดที่ไม่ออกฤทธิ์ ความร้อนไล่คาร์บอนไดออกไซด์ออกและเปลี่ยน THCA เป็น THC เพราะคาร์บอนไดออกไซด์ที่เสียไปนั้นมีน้ำหนัก THC รวมจึงเท่ากับ THCA คูณ 0.877 บวกกับ THC อิสระที่มีอยู่ ช่อที่วัดได้ THC รวม 22 เปอร์เซ็นต์แทบไม่มี THC ที่ออกฤทธิ์เลยจนกว่าจะถูกให้ความร้อน ช่อดิบแทบไม่ทำให้เมาเลย — ในตอนนี้ THCA ต้องถูกให้ความร้อนกลายเป็น THC และมันสูญน้ำหนักระหว่างทาง THCA รูปกรด — สิ่งที่อยู่ในช่อดิบ ไม่ออกฤทธิ์ ความร้อน — decarboxylation ไล่ CO₂ ออก THC รูปออกฤทธิ์ — หลังให้ความร้อน ทำให้เมา THC รวม = (THCA × 0.877) + THC 0.877 คือน้ำหนักที่เสียไปเป็น CO₂ เมื่อ THCA กลายเป็น THC ช่อที่ “THC รวม 22%” แทบทั้งหมดคือ THCA — มี THC ออกฤทธิ์เกือบศูนย์จนกว่าคุณจะให้ความร้อน
THCA — skeletal structure (C₂₂H₃₀O₄), a cannabinoid acid; aroma: raw, pre-heat THCA C₂₂H₃₀O₄ cannabinoid acid · raw, pre-heat CBDA — skeletal structure (C₂₂H₃₀O₄), a cannabinoid acid; aroma: raw, pre-heat CBDA C₂₂H₃₀O₄ cannabinoid acid · raw, pre-heat CBC — skeletal structure (C₂₁H₃₀O₂), a cannabinoid; aroma: minor CBC C₂₁H₃₀O₂ cannabinoid · minor Δ9-THC — skeletal structure (C₂₁H₃₀O₂), a cannabinoid; aroma: psychoactive Δ9-THC C₂₁H₃₀O₂ cannabinoid · psychoactive CBD — skeletal structure (C₂₁H₃₀O₂), a cannabinoid; aroma: non-intoxicating CBD C₂₁H₃₀O₂ cannabinoid · non-intoxicating CBG — skeletal structure (C₂₁H₃₂O₂), a cannabinoid; aroma: the 'mother' molecule CBG C₂₁H₃₂O₂ cannabinoid · the 'mother' molecule

วิธีนำไปปฏิบัติ

  • ยอมรับว่าเพดานความแรงของสายพันธุ์คุณเป็นเรื่องพันธุกรรม ไม่มีธาตุอาหาร สเปกตรัมแสง เทคนิคความเครียด หรือสารเสริมใดทำให้สายพันธุ์ THC 15% ทดสอบออกมา 25% งานของคุณคือช่วยให้ต้นไปถึงเพดานของมัน — ไม่ใช่ยกเพดาน ทุกโมดูลก่อนหน้าแสดงว่าตัวแปรที่ควบคุมได้ (แสง ธาตุอาหาร น้ำ) ส่งผลต่อผลผลิต ไม่ใช่เปอร์เซ็นต์ความแรง

  • เข้าใจการแปลง THCA → THC เวลาอ่านผลแล็บ รายงานแล็บส่วนใหญ่ให้ “รวม THC” ซึ่งคำนวณเป็น: รวม THC = (THCA × 0.877) + THC ตัวคูณ 0.877 คิดถึงมวลที่สูญไประหว่าง decarboxylation ถ้าแล็บรายงาน 22% รวม THC THC จริงในดอกดิบใกล้ศูนย์ — เกือบทั้งหมดเป็น THCA ที่จะแปลงเมื่อได้รับความร้อน

  • ถ้าคุณสนใจการเพาะพันธุ์ ให้รู้ว่าการถ่ายทอดอัตราส่วน THC:CBD ค่อนข้างเรียบง่าย มันถูกควบคุมเป็นหลักโดย locus เดียวที่มี allele แบบ codominant การผสมต้น THC สูงสองต้นให้ลูก THC สูง การผสม THC สูงกับ CBD สูงให้ลูกที่มีอัตราส่วนผสม 1:1 นี่คือหนึ่งในลักษณะที่ทำนายได้มากกว่าในการเพาะพันธุ์กัญชา

  • ทำงานกับเพดานจริงของพันธุกรรมคุณ ถ้าคุณรัน setup ที่ให้แสง ป้อนอาหาร และรดน้ำถูกต้องแล้วความแรงทรงตัว พันธุกรรมคือคอขวด ทางแก้คือพันธุกรรมที่ดีขึ้น ไม่ใช่ธาตุอาหารที่แพงขึ้น

Seb’s Corner (Level 2+)

วิทยาเอนไซม์ของชีวสังเคราะห์ cannabinoid ก้าวหน้าไปมากตั้งแต่ review ปี 2021 ของ Tahir แต่เส้นทางหลักยังเป็นที่ยอมรับดี THCA synthase (THCAS) เป็น oxidoreductase ที่พึ่ง FAD ขนาด 545 กรดอะมิโน ซึ่งเร่งปฏิกิริยา oxidative cyclisation แบบ enantiospecific ของ CBGA โครงสร้างผลึก (PDB: 3VTE, Shoyama et al. 2012) เผยให้เห็น active site ที่ฝังลึกพร้อม FAD ที่ผูกแบบ covalent ยึดโดย His114 และ Cys176 CBDAS มีความเหมือนของลำดับ 84% กับ THCAS และความต่างหลักใน specificity การเร่งปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยว่าเอนไซม์ดึงโปรตอนจากหมู่ methyl ปลาย (CBDAS) หรือหมู่ hydroxyl (THCAS) ของ CBGA ซึ่งกำหนดผลิตภัณฑ์ cyclisation การกลายพันธุ์กรดอะมิโนเดียว — A414V ใน THCAS — สร้าง analogue ที่ผลิต CBDA สูงขึ้นสามเท่า แสดงให้เห็นคมมีดวิวัฒนาการระหว่างสองเส้นทางนี้ สำหรับนักปลูก สิ่งที่นำไปใช้ได้คือ chemotype (THC-dominant vs CBD-dominant) เป็นหนึ่งในลักษณะที่จัดการทางพันธุกรรมได้ง่ายที่สุดในกัญชา ถูกควบคุมโดยยีนจำนวนน้อยที่ถูกอธิบายไว้ดี นี่คือเหตุผลที่ seed bank ติดป้ายอัตราส่วน chemotype ได้น่าเชื่อถือ ความแรงภายใน chemotype หนึ่ง (เช่น 18% vs 25% THC ในสองสายพันธุ์ THC-dominant ที่ต่างกัน) มีแนวโน้มเป็น polygenic เกี่ยวข้องกับการแปรผันในระดับการแสดงออกของ THCAS ความหนาแน่น trichome จังหวะการสุกของ trichome และการจัดหา GPP — ซึ่งทั้งหมดเลือกได้ยากกว่า และอธิบายว่าทำไมคำกล่าวอ้าง “ความแรงสูง” บนเมล็ดถึงน่าเชื่อถือน้อยกว่าคำกล่าวอ้าง chemotype

สิ่งที่ต้องระวัง

  • กับดักธาตุอาหาร: ผลิตภัณฑ์ที่อ้างว่า “ปลดล็อกความแรงที่ซ่อนอยู่” หรือ “เพิ่มการแสดงออก cannabinoid สูงสุด” เป็นนิยายการตลาด ไม่มีสูตร NPK ธาตุอาหารรอง หรือสารเสริมใดเปลี่ยนพันธุกรรมที่คุณทำงานด้วย ถ้าเพดานคือ 20% นั่นแหละคือเพดาน

  • ความสับสนเรื่อง decarboxylation: รายงานแล็บที่แสดง “22% THC” ไม่ได้หมายความว่า 22% ของดอกสดคือ THC ส่วนใหญ่นั้นคือ THCA ที่รอความร้อน เข้าใจคณิตการแปลงก่อนเปรียบเทียบผล

  • การทำให้การเพาะพันธุ์ง่ายเกินไป: อัตราส่วน THC:CBD ถ่ายทอดง่าย แต่การบรรลุเป้าหมายความแรงเฉพาะภายใน chemotype ต้องใช้การคัดเลือกหลายชั่วรุ่นสำหรับระดับการแสดงออกและลักษณะสนับสนุน ความแรงสูงไม่ใช่ลักษณะยีนเดียว

  • ความเชื่อผิดเรื่องความแรงสด vs บ่ม: THCA บางส่วนแปลงระหว่างการทำให้แห้งและการบ่ม (ไม่กี่เปอร์เซ็นต์) แต่ decarboxylation หลักเกิดเมื่อคุณบริโภคมัน อย่าสับสนผลของการบ่มกับการเปลี่ยนแปลงความแรงที่แท้จริง

Quiz

1. รายงานแล็บของคุณบอกว่า “รวม THC: 22%” ในดอกสดที่ยังไม่บ่ม จริงๆ แล้วเป็น THC เท่าไร?

2. THCA synthase และ CBDA synthase อธิบายได้ดีที่สุดว่า:

3. (ถูก/ผิด) การเร่งธาตุอาหารหรือแสงสามารถยกเพดานความแรงทางพันธุกรรมของสายพันธุ์คุณได้

4. ผสมสายพันธุ์ THC สูง (BT/BT) กับสายพันธุ์ CBD สูง (BD/BD) F1 ส่วนใหญ่ทำอะไร?

5. ทำไมการเพาะพันธุ์เพื่อ “ความแรงสูง” ถึงยากกว่าการเพาะพันธุ์เพื่อ “chemotype THC-dominant”?